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厕所生活污水处理设备_0《资讯》

发布时间:2020-08-20 17:58:39 阅读: 来源:分级机厂家

厕所生活污水处理设备

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DNA的提取和PCR扩增  采用FastDNATMSPIN Kit For Soil提取样品基因组DNA.以样品基因组DNA为模板, 采用细菌通用引物GC-338F和518R扩增样品16S rDNA高变区序列. PCR扩增体系(50 μL)为: 10×PCR buffer 5 μL; dNTP(2.5 mmol ·L-1)3.2 μL; rTaq(5 U ·μL-1)0.4 μL; GC-338F(20 mmol ·L-1)1 μL; 518R(20 mmol ·L-1)1 μL; 模板DNA 50 ng; 补ddH2O至50 μL.  PCR扩增程序为: 94℃预变性5 min; 94℃变性1 min, 55℃复性45 s, 72℃延伸1 min, 30个循环; 最终72℃延伸10 min. PCR产物采用OMEGA公司DNA Gel Extraction Kit纯化回收.  PCR仪为Biometra公司生产的T-gradient, 凝胶成像仪为Bio-Rad公司的Gel-Doc2000凝胶成像系统.

1.5 PCR产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析  取10 μL PCR的产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析.采用变性梯度为35%~55%、浓度为7%的聚丙烯酰胺凝胶在1×TAE缓冲液中150V 60℃下电泳5 h.  变性梯度凝胶电泳(DGGE)完毕后、采用银染法染色、步骤如下:固定液(乙醇50 mL、冰醋酸2.5 mL、定容500 mL)固定15 min; Milli-Q纯水清洗、20 s和2 min各一次; 银染液(硝酸银1 g、37%甲醛0.75 mL、定容500 mL)染色15 min; Milli-Q纯水清洗、20 s和2 min各一次; 显色液(氢氧化钠7.5 g、37%甲醛2.5 mL、定容500 mL)显色5~7 min; 最后用终止液(乙醇50 mL、冰醋酸2.5 mL、定容500 mL)终止反应.染色结束后在Gel-Doc2000(Bio-Rad, USA)凝胶成像系统上拍照.  1.6 DGGE图谱中优势条带的回收与测序  用灭菌的手术刀切下待回收DGGE条带, 采用OMEGA公司Poly-Gel DNA Extraction Kit回收目的条带.  以2 μL回收产物为模板, 338F/518R为引物进行PCR扩增. PCR扩增体系(50 μL)为: 10×PCR buffer 5 μL; dNTP(2.5 mmol ·L-1)3.2 μL; rTaq(5 U ·μL-1)0.4 μL; 338F(20 mmol ·L-1)1 μL; 518R(20 mmol ·L-1)1 μL; 模板DNA 1 μL; 补ddH2O至50 μL. PCR扩增程序为: 94℃预变性4 min; 94℃变性30 s, 55℃复性30 s, 72℃延伸30 s, 30个循环; 最后, 72℃延伸10 min.  将重新扩增的DNA片段切胶回收、纯化后, 连接到Pmd18-T载体上, 并转化至DH5α感受态细胞中, 筛选阳性克隆, 菌液采用测序仪(ABI 3730, 美国)对插入的细菌16S rDNA片段进行序列测定.聚己内酯(PCL)和黏土陶粒分别由深圳光华伟业实业有限公司和江西萍乡三河陶瓷有限公司提供, 两种填料的理化性质如表 1所示.  1.2 试验装置  CS-BAF-SPDB主要由混凝沉淀池, 硝化滤池和固相反硝化滤池组成, 滤池主体采用有机玻璃制作, 其结构如图 1所示.其中混凝池和沉淀池的体积均为10 L; 曝气生物滤池的滤柱高度为175 cm, 内径为8 cm, 滤柱内填充的滤料为黏土陶粒, 填充高度为87 cm, 从承托层顶部到填料顶部共设4个取样口(B1、B2、B3和B4);固相反硝化滤池的滤柱高度为130 cm, 内径为8 cm, 滤柱内填充的滤料为聚己内酯颗粒, 填充的高度为27 cm, 从承托层顶部到填料顶部共设3个取样口(D1、D2和D3).曝气生物滤池和固相反硝化滤池的有效体积(液体体积)分别为4.0 L和3.2 L.工艺进水流量通过蠕动泵(BT-1002J)控制.曝气生物滤池由空压机供气, 进气量通过气体流量计和阀门控制.温度控制仪严格控制进水水温和滤池内的温度.图 1 试验装置示意

1.3 反应器运行与取样方法  前期的研究成功实现了CS-BAF-SPDB的启动, 并确定了BAF进水中的合适C/N比, BAF和SPBD的理想HRT和运行的适宜温度.为研究低碳源条件下气水比对CS-BAF-SPDB工艺脱氮效果的影响.保持进水氨氮浓度为30 mg ·L-1, 混凝沉淀单元出水中的C/N控制在3 :1, 温度维持在(28℃ ±1℃), BAF和SPDB的水力停留时间分别为4 h和2 h, 使得BAF的气水比在6 :1(进气量100 mL ·min-1)到1 :1(进气量16.7 mL ·min-1)的范围内变化.当连续3 d出水的NO3--N浓度相对误差在5%之内, 认为系统在该气水比条件下已趋于稳定, 可以改变气水比到另一水平.另外, 前期的研究已经确定, BAF中的硝化菌主要集中在B3取样口, 而SPDB中的反硝化菌主要集中在D2取样口.因此, B3和D2取得生物膜样品更具有代表性.当系统在各气水比条件下稳定运行时, 从B3和D2取样点取生长有生物膜的陶粒和固体碳源填料, 利用超声波将填料上的生物膜剥离, 去掉填料, 离心后弃掉上清液, 沉淀物即生物膜样品, -20℃保存. 控制系统温度为(30±1)℃、pH为7.8~8.2、正常硝化段DO为0.7~1.0 mg·L-1, 再结合pH和DO参数对硝化过程实施在线控制, 可以经过17个周期的驯化培养, 快速启动短程硝化(NO2--N积累率超过80%).  (2) 对于已启动短程硝化的玉米淀粉废水SBR处理系统, 逐渐取消对系统高温及高pH的限制, 在碱度充足、常温(23~24℃)和较低DO(正常硝化段为0.7~1.0 mg·L-1)条件下, 结合对硝化过程的在线控制, 最终可以获得NO2--N积累率超过98%的短程硝化长期稳定运行.  (3) 先采用高温、高pH和低DO, 并结合对硝化过程在线控制快速启动短程硝化, 然后再逐渐取消对系统高pH及高温限制的控制策略, 对于具备较高氨氮浓度和较高温度的现场玉米淀粉废水实现长期稳定的短程硝化具有现实意义.

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